Microorganismos asociados a lenticelosis y pudrición de pedúnculo del aguacate Hass del departamento del Cauca

Study Extent

La zona de estudio se ubicó en el departamento del Cauca, en el suroccidente de Colombia, donde se visitaron 67 fincas con cultivos comerciales de aguacate Hass en estado productivo en nueve municipios (Corinto, Toribío, Morales, Piendamó, Cajibío, Popayán, El Tambo, Timbío Sotará). Los predios se ubicaron entre los 1.613 y 2.239 msnm con diferentes niveles de manejo tecnológico del cultivo de aguacate Hass y con problemáticas asociadas a las lenticelas y el pedúnculo de los frutos

Sampling

En cada predio se hizo un recorrido de forma aleatoria y se recolectaron 10 frutos que mostraron síntomas caracterizados por la presencia de lesiones negras, redondeadas, lisas y compactas sobre la superficie de las lenticelas del fruto, y la presencia de lesiones de color marrón a lo largo de la superficie del pedúnculo. Los frutos se colectaron con el pedúnculo adherido, se empacaron en bolsas de papel debidamente rotuladas y se introdujeron en bolsas con cierre hermético para transportarlas en neveras refrigeradas hasta el laboratorio de fitopatología de la Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria AGROSAVIA, Centro de Investigación Palmira, Colombia, para su procesamiento.

Method steps

1. Selección de predios: a partir de talleres con productores, se seleccionaron 67 fincas en nueve municipios para realizar la evaluación y el muestreo, las cuales se ubicaron entre los 1.613 y 2.239 msnm con diferentes niveles de manejo tecnológico del cultivo.
2. Toma de muestras: En cada predio se hizo un recorrido de forma aleatoria y se recolectaron 10 frutos que mostraron síntomas caracterizados por la presencia de lesiones negras, redondeadas, lisas y compactas sobre la superficie de las lenticelas del fruto, y la presencia de lesiones de color marrón a lo largo de la superficie del pedúnculo. Los frutos se colectaron con el pedúnculo adherido, se empacaron en bolsas de papel debidamente rotuladas y se introdujeron en bolsas con cierre hermético para transportarlas en neveras refrigeradas hasta el laboratorio de fitopatología de la Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria AGROSAVIA, Centro de Investigación Palmira, Colombia, para su procesamiento.
3. Aislamiento de microorganismos: Los frutos de cada finca se sumergieron en una solución de agua y jabón líquido de pH neutro, se lavaron con agua de grifo y se desinfectaron mediante lavado seriado con hipoclorito de sodio al 1.5% (1 min.), etanol al 70% (1 min.), agua destilada estéril. El secado de los frutos se realizó con toallas estériles en cabina de flujo laminar. Una parte de los frutos de cada finca se seleccionó para extraer fragmentos de tejido afectado con avance de las lesiones, las cuales se sembraron directamente en medio de cultivo PDA (Papa-Dextrosa-Agar, Difco® 39000 ppm), las siembras se incubaron a 24°C durante siete días. La otra parte de los frutos se dispuso en cámaras húmedas, los cuales se distribuyeron de manera uniforme evitando el contacto directo entre ellos. En cada cámara húmeda se introdujeron frutos de la misma finca, las muestras se incubaron durante 15 días a temperatura ambiente y fotoperiodo de 12/12 (horas de luminosidad y oscuridad, respetivamente) hasta alcanzar la madurez de consumo. Una vez terminado el proceso de incubación, los frutos fueron analizados mediante observaciones al estereoscopio para identificar la presencia de estructuras de los microorganismos presentes en las lesiones de las lenticelas y en el pedúnculo, y las submuestras de micelio o masas conidiales fueron transferidas por siembra en medio de cultivo PDA (Papa-Dextrosa-Agar) para obtener las respectivas colonias. Finalmente, los frutos maduros se abrieron longitudinalmente para evaluar el desarrollo de las lesiones internas en la pulpa y los haces vasculares, y a partir de éstas se tomaron submuestras para la siembra en medio PDA. Las cajas Petri con las diferentes submuestras se incubaron a 24°C durante dos semanas y fotoperiodo 12/12 (oscuridad y luminosidad) hasta obtener el crecimiento de los microorganismos, una vez diferenciado el tipo de crecimiento se repicó cada microorganismo en una nueva caja para obtener las colonias individuales.
4. Identificación morfológica: Los microorganismos obtenidos se agruparon por características morfológicas de crecimiento similar (morfotipos). En observaciones al estereoscopio y el microscopio de luz, se identificaron características macroscópicas y microscópicas presentes en cada grupo. La identificación de los hongos se realizó utilizando la clave taxonómica propuesta por Barnett y Hunter (1998).

Toda la colección pertenece al reino Fungi.

1. Fungi
   rank: kingdom

Departamento del Cauca: Municipios de Corinto, Toribío, Morales, Piendamó, Cajibío, Popayán, El Tambo, Timbío, Sotará.