Colección de Giardiasis del Instituto Nacional de Salud

Study Extent

Las muestras recolectadas se procesaron y analizaron en el Instituto Nacional de Salud, sede Teusaquillo, Avenida calle 26 No. 51-20

Sampling

1. Se estandarizo y evalúo una prueba inmunoenzimática (ELISA) para la detección de anticuerpos tipo IgG anti-Giardia duodenalis en sueros de pacientes con la infección. La preparación del antigeno se hizo a partir de trofozoitos cultivados que, inicialmente, fueron obtenidos del intestino de gerbils (Meriones unguiculatus) infectados experimentalmente con quistes purificados a partir de muestras positivas de materia fecal humana (Duque et al., 2001) 2. Con el fin de determinar los antígenos de los aislamientos colombianos de G. duodenalis reconocidos por IgG y sus subclases anti-G. duodenalis, se utilizó la metodología de Western blot. Quistes y trofozoítos del parásito, independientemente, se sometieron a separación de proteínas mediante SDS-PAGE. Las proteínas separadas fueron transferidas a membrana de nitrocelulosa mediante inmunoelectrotransferencia y su antigenicidad determinada confrontando éstas con IgG y sus subclases anti-G. duodenalis presentes en el suero de pacientes con giardiosis comprobada parasitológicamente (Hernández et al., 2003) 3. Identificar los antígenos estimuladores de la producción de IgA anti-Giardia duodenalis de aislamientos colombianos del parásito (Olmos et al., 2003)

Method steps

1. Para la estandarización y evaluación de la prueba, se emplearon 60 sueros de pacientes con giardiosis comprobada parasitológicamente (muestras positivas) y 47 sueros de cordón umbilical recién cortado (muestras negativas). Como conjugado, se utilizó anti-lgG humana ligada a fosfatasa alcalina. La concentración óptima de antígeno de trofozoíto de G. duodenalis fue de 15 ug/ml y las diluciones óptimas de suero y conjugado fueron 1:25 y 1:400, respectivamente. El valor del punto de corte (absorbancia) fue 0,300. Los parámetros de la prueba fueron: sensibilidad, 98,3% (intervalo de confianza de 95% (lC 95%): 89,9%-99,974); especificidad, 957% (IC 95%:84,3%-99,3%); valor predictivo positivo, 96,7% (IC 95%: 87,6%-99,4%), y valor predictivo negativo, 97,8% (IC 95%: 87,0%-99,9%). (Duque et al., 2001)
2. La unión antígeno-anticuerpo se detectó con conjugados anti-inmunoglobulina específicos unidos a fosfatasa alcalina, la cual permitió evidenciar los polipéptidos antigénicos cuando se adicionó el sustrato 5-bromo-4-cloro-3-indolil-fosfato/azul de nitrotetrazolio. Se leyeron y analizaron las bandas mediante análisis de regresión lineal, utilizando el programa Quantity One (Hernández et al., 2003)
3. Se realizó separación de proteínas de quistes y trofozoítos mediante SDS-PAGE y su antigenicidad se determinó por electroinmunotransferencia (Olmos et al., 2003)

Este conjunto de datos comprende 789 registros biológicos, con 20 taxones únicos. Se encuentran distribuidos en 5 reinos: Animalia (3.54%), Bacteria (13%), Chromista (2.15%), Fungi (0.12%) y Protozoa (81%). Un 90.2% está clasificado a nivel de especie, 9.5% a género, 0.12% a familia y 0.12% a categorías superiores. El reino Animalia se encuentra distribuido en 3 filos, 3 clases, 3 ordenes, 3 familias, 4 géneros y 3 especies. El 71% se encuentra clasificado hasta especie y el 28% a género.

1. Echinodermata
   rank: phylum
2. Nematoda
   rank: phylum
3. Platyhelminthes
   rank: phylum

El reino Bacteria se encuentra distribuido en 1 filo, 1 clase, 1 orden, 1 familia, 1 género y 1 especie.

1. Proteobacteria
   rank: phylum

El reino Chromista se encuentra distribuido en 1 filo, 1 clase, 1 orden, 1 familia, 1 género y 1 especie.

1. Bigyra
   rank: phylum

El reino Protozoa se encuentra distribuido en 3 filo, 4 clases, 4 ordenes, 4 familias, 6 géneros y 5 especie. El 92% se encuentra clasificado hasta especie, el 7.8% a género y el 0.15% a familia.

1. Amoebozoa
   rank: phylum
2. Metamonada
   rank: phylum
3. Sarcomastigophora
   rank: phylum

Las muestras recolectadas se procesaron y analizaron en el Instituto Nacional de Salud, sede Teusaquillo, Avenida calle 26 No. 51-20