Peces de agua dulce presentes en diferentes ríos de la cuenca del Orinoco, en los departamentos de Casanare y Meta

Study Extent

Río tributarios de la cuenca del río Meta en el departamento de Casanare.

Sampling

Data collection: Fieldwork will be performed during the dry season (January-February 2022) to collect specimens potentially in hypoxic conditions. Several western tributaries of the Meta River will be sampled at multiple locations. At each field location, several species will be sampled (maximum 30 adult individuals per species per field location). This sampling will allow us to evaluate phenotypic and genetic differences over an environmental gradient for each river. Fieldwork permit was already submitted to ANLA through the inclusion of Tiago P. Carvalho into the Permiso Marco de colecta de la Pontificia Universidad Javeriana (PUJ) to collected biological material. Ethnical and Protected areas are not going to be sampled. Ethical permit for handling animals on experimentation (see below) is being evaluated by the ethic committee at PUJ CICUA and already approved at UBC. All security protocols will follow the standard protocols of self-care and biosafety from the Faculdad de Ciencias from the PUJ (https://ciencias.javeriana.edu.co/autocuidado-y-bioseguridad). In the field, environmental measures including water and air temperature, dissolved oxygen and pH, will be recorded. To isolate the plastic response and identify the specimens that present the adaptive background to respond to hypoxia we will perform a physiological experiment with a subsample of G. valencia specimens at each location (maximum of 30 individuals). Briefly, specimens will be kept in sealed aquarium with low oxygen for 6 hours29 to calculate the frequency of individuals that trigger morphological responses to hypoxia. Dissolved oxygen will be regulated using bubbled nitrogen gas with pressure valves and air stones at the bottom of the aquarium to maintain the DO levels around 0.5ppm31,32. To keep distribution records, allow taxonomic identification and morphological analyses, a maximum of 30 individuals per species will be fixated in formalin and a tissue sample in ethanol at each fieldwork location – around 100 species will be collected in total and all will be curated and housed in the Ichthyology Collection at PUJ (MPUJ).

Quality Control

En el proceso de estructuración y validación de los datos se realizó el control de la calidad de la información. A continuación, se enumeran los procesos asociados a esta actividad: 1. Revisión de la información documentada asociada a los datos biológicos; 2. Estructuración de los datos en el estándar Darwin Core (DwC) según elementos, definiciones y vocabularios controlados; 3. Validación y limpieza de la información consignada en el DwC.

Method steps

1. Las colectas realizadas hacen parte de los Lineamientos de Colecciones Biológicas de la PUJ, contribuyendo al conocimiento de la biodiversidad del país. De acuerdo con los objetivos de las expediciones, los procedimientos realizados a los peces (fijación y muestras de tejido) no se realizan sin eutanasia debido a que serían sumamente invasivos. Puntos de coleta en cada rio (e.g., Casanare, Ariporo, Cusiana) serán seleccionados para garantir muestreo al largo del curso (mas ahiba, medio y bajo).
2. Estos son los procedimientos de colecta: durante la salida de campo, en los sitios de muestreo se procede a pescar por medio de diferentes métodos de pesca, todos aprobados y validados por el Ministerio de Ambiente y Desarrollo Sostenible-MADS (Zapata et al., 2010). Se combinarán diferentes artes de pesca: i) redes de arrastre de dos tipos (de 3 m de longitud, 2 m de alto, y 0,5 m de diámetro de ojo, y 8 m de longitud, 2 m de alto, y 0,5 m de diámetro de ojo); ii) pesca manual con nasa (consta de un aro en aluminio y una bolsa que va amarrada al aro en la cual los peces van a ser capturados).
3. Se decide cuáles especies son colectadas dependiendo de si están clasificadas con algún grado de amenaza o en veda y también cuántos individuos de las especies a colectar (máximo de 30 por especie). Se dará prioridad para captura de individuos adultos, una vez que estos permiten tener mas certeza en la identificación taxonómica. Los individuos que no se colectan son devueltos al cuerpo de agua. La coleta en cada punto de muestreo durara un máximo de 1.5 horas y diferentes ambientes serán amostrados, como el rio principal y charcos próximos del rio.
4. Los peces colectados serán mantenidos en cubos o bolsas plásticas con suficiente agua con burbujas de aire y bajo la sombra en una densidad a cerca de 1 pez por litro de agua. Posteriormente, para la eutanasia de los peces, se agregan gotas de aceite de clavo (Syzygium aromaticum), con una dosis de 0.4ml/L de agua (Fernandes et al., 2017; marcas como: Now, Naturpiel o Naturveda). Este aceite contiene Eugenol, sustancia aprobada para ser usada en peces de agua dulce por el Servicio de Pesca y Vida Silvestre de EE. UU. (UFR -Use of Fishes in Research- Committee. 2013; USFWS Fisheries, 2015 https://www.fws.gov/fisheries/aadap/inads/study_protocols/AQUISE-study-protocol.pdf y 2017 https://www.fws.gov/fisheries/aadap/dribs/DRIB 54_AQS20E-sedation-yellowtail_white-seabass_FINAL.pdf).
5. Una vez los peces están muertos o con señales de pérdida de sensibilidad (sin movimiento opercular respiratorio y en posición vientre hacia arriba), se fijan en formol al 10%, según metodología estandarizada para este fin, evitándose así la descomposición de los tejidos (Maldonado-Ocampo et al., 2005). http://awsassets.panda.org/downloads/peces_de_los_andes_de_colombia.pdf). De algunos individuos ya muertos, antes de fijarlos en formol, se realizará una muestra de tejido retirando una pequeña porción de músculo (5 mm x 5 mm) del lado derecho del individuo para estudios moleculares. Cada individuo recibirá un número de identificación, la muestra de tejido se almacenará en un eppendorf de 2 ml con etanol al 96% y los especímenes se fijarán en formol al 10%. Se debe tener en cuenta que todos los procedimientos que impliquen manipulación de peces, serán realizados con guantes quirúrgicos y tapabocas. Entre localidades dentro de un mismo río, las redes de pesca serán lavadas con abundante agua y secadas después de cada uso., para entre tributarios, redes también serán lavadas con hipoclorito para asegurar que no se trasladen patógenos entre región geográficas distintas. En el campo, las medidas ambientales, que incluyen la temperatura del agua y del aire, el oxígeno disuelto y el pH, se registrarán con una sonda (marca: Ysi professional plus).
6. La elevación y las coordenadas espaciales se registrarán con un GPS. Todos los tejidos y muestras se clasificarán, identificarán hasta el nivel de especie y se alojarán en la colección de ictiología de la Pontificia Universidad. Javeriana en Bogotá - Colombia. Una vez que se identifican los peces, se cuantificarán los rasgos morfológicos asociados con la adaptación local al medio ambiente, como las extensiones dérmicas de los labios, la forma del cuerpo y el área del filamento branquial utilizando medidas y recuentos de los rasgos morfológicos. Las muestras de tejido de Gephyrocharax valencia se utilizarán para extraer ADN para ensayos genómicos para evaluar la variación y diferenciación en varios genes. Mas específicamente, para caracterizar las frecuencias alélicas de las poblaciones que abarcan toda el área del trabajo de campo, se generarán datos genómicos utilizando dos bibliotecas de representación reducida (RADSeq; Peterson et al., 2012) y secuenciadas en la plataforma Illumina HiSeq.

Los 521 registros biológicos de este recurso corresponden a Peces y se distribuyen en 7 órdenes, 28 familias, 92 géneros y 133 especies. El 78.50% de los registros fue identificado a nivel de especie y el 21.50% restante, identificado a nivel género.

1. Acestrorhynchidae
   rank: family
2. Anostomidae
   rank: family
3. Apteronotidae
   rank: family
4. Aspredinidae
   rank: family
5. Astroblepidae
   rank: family
6. Auchenipteridae
   rank: family
7. Bryconidae
   rank: family
8. Callichthyidae
   rank: family
9. Characidae
   rank: family
10. Cichlidae
    rank: family
11. Crenuchidae
    rank: family
12. Curimatidae
    rank: family
13. Doradidae
    rank: family
14. Erythrinidae
    rank: family
15. Gasteropelecidae
    rank: family
16. Hemiodontidae
    rank: family
17. Heptapteridae
    rank: family
18. Lebiasinidae
    rank: family
19. Loricariidae
    rank: family
20. Parodontidae
    rank: family
21. Pimelodidae
    rank: family
22. Poeciliidae
    rank: family
23. Prochilodontidae
    rank: family
24. Pseudopimelodidae
    rank: family
25. Serrasalmidae
    rank: family
26. Sternopygidae
    rank: family
27. Trichomycteridae
    rank: family
28. Triportheidae
    rank: family

Las cuencas (tributarios del río Meta) de los ríos Casanare, Ariporo, Pauto, Cravo Sur, Cusiana y Upía, en el departamento del Casanare.