Tejidos de insectos recolectados en trampas Malaise en los departamentos de Santander, Antioquia y Vichada - Proyecto Colombia Bio

Study Extent

Las muestras provienen de Insectos recolectados en El Peñón - Santander, El Carmen de Viboral - Antioquia y Puerto Carreño - Vichada. Se ubicaron estratégicamente tres puntos de muestreo donde se utilizaron trampas malaise para la captura de los insectos con un esfuerzo de muestreo de 8 a 9 días. Se colocan este tipo de trampa de interceptación de vuelo para capturar insectos de los órdenes objeto de estudio.

Sampling

Se realizan 95 extracciones por día para completar cada microplaca de tejido, manejando un protocolo estricto de asepsia, cada muestra es depositada en los pozos de la microplaca con 3 gotas de alcohol. Al finalizar la microplaca fue debidamente sellada, almacenada en refrigeración y enviada al Laboratorio de Genética de la Conservación en el CIAT para su posterior análisis.

Quality Control

Se mantuvo una estricta asepsia para las extracciones, limpiando el área de trabajo y las herramientas a usar. Se llevó un orden en una hoja de registro en físico y en digital. Ajuste de vocabularios controlados en: Elementos de registros: basisOfRecord, type y collectionID de acuerdo a la naturaleza de los datos;

Method steps

1. Después de seleccionar, individualizar, catalogar y sistematizar el material de cada expedición se procede a realizar las extracciones de tejido siguiendo estrictamente el protocolo que se describe a continuación: 1. Preparación del lugar de trabajo, materiales de extracción y muestras: - (Antes de iniciar, se tenían previamente, seleccionados y organizados los 95 ejemplares a extraer, con su respectiva hoja de registro). - El lugar o mesa de trabajo inicialmente se limpió con eliminasa o con hipoclorito y finalmente con H2O destilada y Alcohol para eliminar posible contaminación. Después del protocolo de limpieza cada microplaca fue individualmente marcada con su correspondiente numeración, el Orden de los ejemplares contenidos (Ej.: Diptera) y la fecha de la extracción. Dos etiquetas se colocaron en cada microplaca, una en marcador negro sharpie debajo de la columna H y otra en cinta de enmascarar al costado derecho al lado de la fila 12. Se agregaron tres gotas de alcohol por cada pozo (para minimizar la evaporación del mismo durante el tiempo de permanencia en el Instituto hasta el envío al CIAT para su posterior extracción de ADN) y luego la microplaca fue cubierta con el papel aluminio. 2. Previamente se organizaron los 95 tubos eppendorf con los ejemplares a extraer en la placa organizadora (96 es el número correspondiente al número de pozos que contiene una microplaca, dejando como blanco el pozo H12 (Figura 1)). 3. Durante el protocolo de extracción, por cada muestra se realizó la asepsia de las pinzas, pasándolas por eliminasa, dos veces por agua destilada, una vez por alcohol y el flameado. 4. La extracción de tejido (patas en su mayor porcentaje y en algunos pocos coxas) se realizó utilizando unas pinzas de punta extrafina, sosteniendo el ejemplar sobre su mismo tubo eppendorf, y luego depositando la muestra en cada pozo de la microplaca siguiendo un orden consecutivo y haciendo el respectivo señalamiento en la hoja de registro. 5. Al finalizar las 95 extracciones por microplaca se retiró el papel aluminio y se cubrieron con sus respectivas tiras de tapas asegurando que éstas quedaran bien selladas. Todas las microplacas fueron almacenadas en la nevera hasta completar la extracción de todos los ejemplares. Cada microplaca se envolvió en papel aluminio y se individualizó en bolsas herméticas para su envío al Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT).

Los tejidos se extraen de los siguientes grupos taxonómicos: Orden Psocoptera representado por 4 familias: Caeciliusidae, Lachesillidae, Dolabellopsocidae, y Epipsocidae. Hemiptera, representado por 12 familias: Achilidae, Aphididae, Cercopidae, Cicadellidae, Cixiidae, Cydnidae, Delphacidae, Derbidae, Dipsocoridae, Lygaeidae, Membracidae y Miridae. Hymenoptera, representado por 1 Suborden: Symphyta y 29 familias: Apidae, Bethylidae, Braconidae, Ceraphronidae, Chalcididae, Chalcidoidea, Chrysididae, Crabronidae, Cynipidae, Diapriidae, Dryinidae, Encyrtidae, Eupelmidae, Eurytomidae, Evaniidae, Figitidae, Formicidae, Halictidae, Ichneumonidae, Mutillidae, Mymaridae, Pelecinidae, Platygastridae, Pompilidae, Pteromalidae, Scelionidae, Sphecidae, Tiphiidae y Vespidae. Diptera representado por 2 Subordenes: Nematocera y Brachycera y por 47 familias: Anisopodidae, Agromyzidae, Anthomyiidae, Asilidae, Bibionidae, Calliphoridae, Carnidae, Cecidomyiidae, Ceratopogonidae, Chironomidae, Chloropidae, Clusiidae, Coelopidae, Conopidae, Culicidae, Dolichopodidae, Drosophilidae, Empididae, Ephydridae, Fanniidae, Keroplatidae, Lauxaniidae, Lonchaeidae, Lygistorrhinidae, Milichiidae, Muscidae, Mycetophilidae, Phoridae, Piophilidae, Pipunculidae, Psilidae, Psychodidae, Richardiidae, Sarcophagidae, Scatopsidae, Sciaridae, Sepsidae, Simuliidae, Sphaeroceridae, Stratiomyidae, Syringogastridae, Syrphidae, Tabanidae, Tachinidae, Tephritidae, Tethinidae y Tipulidae y del orden Coleoptera se extrajeron muestras de 23 familias: Anobiidae, Anthicidae, Buprestidae, Cantharidae, Carabidae, Chrysomelidae, Coccinellidae, Curculionidae, Erotylidae, Lampyridae, Leiodidae, Lycidae, Melolonthidae, Mordellidae, Nitidulidae, Ptilodactylidae, Rhipiphoridae, Silvanidae, Staphylinidae, Tenebrionidae, Throscidae y Scarabaeidae.

1. Psocoptera
   rank: order
2. Hemiptera
   rank: order
3. Hymenoptera
   rank: order
4. Coleoptera
   rank: order
5. Diptera
   rank: order

Las expediciones se realizaron en los siguientes departamentos: Antioquia, Santander y Vichada.